在哪里填充数据并不重要 DataGridView 来自（为什么应该？）。
使用 ReadOnly 财产 DataGridViewColumn 要将其设置为只读：

yourDataGridView.Columns("the_column_name").ReadOnly = True

注意：如果您使用数据绑定（即使用 DataSource 你得等到 DataBindingComplete 在更改列之前激发。
下面是一个简短的运行示例：

Dim con = new SqlConnection("Server=localhost;Database=master;User Id=sa;Password=whatever;")
Dim sqlCmd = new SqlCommand()
With sqlCmd
    .Connection = con
    .CommandType = CommandType.Text
    .CommandText = "Select * from spt_monitor"
End With
Dim sqlDataAdap = new SqlDataAdapter(sqlCmd)

Dim dtRecord = new DataTable()
sqlDataAdap.Fill(dtRecord)

Dim dgv = new System.Windows.Forms.DataGridView()
With dgv
    .DataSource = dtRecord
    .Dock = System.Windows.Forms.DockStyle.Fill
End With

AddHandler dgv.DataBindingComplete, Sub(sender, e) 
    '' access the columns in the DataBindingComplete event
    dgv.Columns("connections").ReadOnly = True
    dgv.Columns(2).ReadOnly = True
End Sub

Dim f = new System.Windows.Forms.Form()
f.Controls.Add(dgv)
f.ShowDialog()